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鉑藝公布轉(zhuǎn)印槽生產(chǎn)操作步驟
發(fā)布時(shí)間:2018-06-27 10:00:43 點(diǎn)擊量:
開始使用轉(zhuǎn)印槽進(jìn)行印花生產(chǎn)時(shí),全程必須戴手套操作,以免污染轉(zhuǎn)印槽中的水質(zhì)
1)電泳后SDS-PAGE 膠片浸在轉(zhuǎn)印緩沖液中,洗2~3 次,每次10min.
2)移動(dòng)到轉(zhuǎn)印槽,先小心放一攪拌子在底部,再倒一半轉(zhuǎn)印緩沖液。
3)取轉(zhuǎn)印紙切成約如膠片大小,先在方形培養(yǎng)皿中以少許甲醇浸濕數(shù)秒鐘,再置入鉑藝轉(zhuǎn)印槽中的緩沖液10 min 后使用。 另取兩張濾紙,以及兩片方形海綿墊,都放在鉑藝轉(zhuǎn)印槽的緩沖液中備用。
4)將轉(zhuǎn)印三明治置入已經(jīng)放有一半轉(zhuǎn)印緩沖液的鉑藝轉(zhuǎn)印槽中,注意有轉(zhuǎn)印紙的那一面向正極(紅色),膠片那面向負(fù)極(黑色)。
5)當(dāng)三明治都放入伯樂轉(zhuǎn)印槽后,以轉(zhuǎn)印緩沖液蓋滿所有的三明治,小心動(dòng)一動(dòng)卡夾,除去附在卡夾內(nèi)外的氣泡,蓋上蓋子,放到一攪拌器上,打開攪拌器開始攪拌,同時(shí)接好電源,裝置完成后放置10 min.
6)以300mA開始轉(zhuǎn)印,溫度會(huì)漸漸上升,轉(zhuǎn)印1.5 h左右 后中止轉(zhuǎn)印,取出轉(zhuǎn)印三明治,打開后依次取出轉(zhuǎn)印紙及膠。
具體轉(zhuǎn)印條件要根據(jù)蛋白的大小進(jìn)行優(yōu)化,注意低溫。
7)轉(zhuǎn)印后的膠片可以繼續(xù)進(jìn)行染色,看有無蛋白質(zhì)殘留。若電泳時(shí)加有藍(lán)色標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)marker(SeeBlue),則可在轉(zhuǎn)印紙上看到藍(lán)色的色帶,確定轉(zhuǎn)印成功,并可評(píng)估轉(zhuǎn)印效率。
鉑藝全自動(dòng)水轉(zhuǎn)印設(shè)備專業(yè)生產(chǎn)廠商。創(chuàng)立于2005年,是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、維修轉(zhuǎn)印槽設(shè)備可將彩色圖紋披覆在任何形狀產(chǎn)品表面,買放心的轉(zhuǎn)印設(shè)備。
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